一、GIBCO, 不含丙酮酸鈉血清? ?概述

    采用正常人血(xue)液為原(yuan)料，經無菌采集(ji)、分(fen)離、微孔(kong)過濾(lv)后而成。本產品無支原(yuan)體、無病毒(du)、無噬毒(du)體、內毒(du)素含量低于(yu)1EU/ml，適用于(yu)細胞(bao)、組織器(qi)官(guan)培(pei)養、細胞(bao)株保(bao)藏、單抗研制，是醫院(yuan)、科研院(yuan)校、動物(wu)疫苗、生物(wu)制藥廠家重要培(pei)養基之一。

主要成分(fen)分(fen)析(xi)
    由血(xue)漿(jiang)去(qu)除(chu)纖(xian)(xian)維(wei)蛋(dan)白(bai)(bai)原而(er)形(xing)成(cheng)的(de)(de)(de)一(yi)種很(hen)復雜的(de)(de)(de)混合物(wu)(wu)，其(qi)組(zu)成(cheng)成(cheng)份(fen)雖(sui)大部分(fen)已知(zhi)，但還有一(yi)部分(fen)尚(shang)不清(qing)楚，且血(xue)清(qing)組(zu)成(cheng)及含(han)量(liang)常(chang)隨供血(xue)動物(wu)(wu)的(de)(de)(de)性(xing)別、年齡、生(sheng)(sheng)理條件和(he)營養條件不同而(er)異。血(xue)清(qing)是血(xue)漿(jiang)中不含(han)纖(xian)(xian)維(wei)蛋(dan)白(bai)(bai)原的(de)(de)(de)膠狀液(ye)體,具有維(wei)持血(xue)液(ye)的(de)(de)(de)正常(chang)粘(zhan)度、酸堿度、滲透(tou)壓等(deng)(deng)作用。它主要由水和(he)各種化(hua)學(xue)成(cheng)分(fen)組(zu)成(cheng),這些(xie)化(hua)學(xue)成(cheng)分(fen)包(bao)括(kuo)白(bai)(bai)蛋(dan)白(bai)(bai)、α1、α2、β、γ-球蛋(dan)白(bai)(bai),甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuan)氨酶等(deng)(deng)。血(xue)清(qing)中含(han)有各種血(xue)漿(jiang)蛋(dan)白(bai)(bai)、多肽、脂肪、碳水化(hua)合物(wu)(wu)、生(sheng)(sheng)長(chang)因子、激素(su)、無機物(wu)(wu)等(deng)(deng)，這些(xie)物(wu)(wu)質對促進細(xi)胞生(sheng)(sheng)長(chang)或抑(yi)制生(sheng)(sheng)長(chang)活性(xing)是達到生(sheng)(sheng)理平衡(heng)的(de)(de)(de)。
二、注(zhu)意事項
1、如何解(jie)凍血清(qing)才(cai)不會使產品(pin)質量受損？
    將血清從冷凍箱(xiang)取出后，先置于2-8C冰箱(xiang)使之(zhi)溶解，然(ran)后在室溫下使之(zhi)全溶。但必須注意(yi)的是，溶解過程中(zhong)必須規則地搖晃均(jun)勻如何避(bi)免沉淀(dian)物的產生?
解(jie)凍血清時(shi)，請按照所建議(yi)的逐步解(jie)凍法(-2O。C至4。C至室溫)，若血清解凍(dong)時(shi)改變(bian)的溫度太大(如-20。C至37。C)，實(shi)驗(yan)顯(xian)示(shi)非常(chang)容(rong)易產生沉淀物。
2、解凍(dong)血(xue)清時(shi)，請隨時(shi)將之(zhi)搖晃均(jun)勻，使溫度(du)及成(cheng)分均(jun)一，減少沉淀的發生
3、請勿將血(xue)(xue)清置于37。C太(tai)久。若在37。C放置太(tai)久，血(xue)(xue)清會(hui)變得混(hun)濁(zhuo)，同(tong)時(shi)血(xue)(xue)清中(zhong)許多較(jiao)不穩定的成(cheng)分也會(hui)因此受到損害，而影響(xiang)血(xue)(xue)清的質量。
4、保存方法
    血(xue)清應保存(cun)(cun)在-5C至(zhi)-2OC。然(ran)而，若存(cun)(cun)放于4C時，請勿超(chao)過(guo)一(yi)個月。若您一(yi)次無法用(yong)完(wan)一(yi)瓶(ping)，建議將無菌(jun)分裝(zhuang)血(xue)清至(zhi)恰(qia)當的(de)滅菌(jun)容器內，再放回冷凍。
三、操作問(wen)題
如何避免沉(chen)淀物的產生?
1、解(jie)凍血清時，請按照所建(jian)議的逐(zhu)步(bu)解(jie)凍法(fa)(-2O。C至(zhi)(zhi)(zhi)4。C至(zhi)(zhi)(zhi)室溫)，若血清解(jie)凍時改變的溫度(du)太大(da)(如-20。C至(zhi)(zhi)(zhi)37。C)，實驗顯示(shi)非(fei)常容易(yi)產生沉淀物。
2、解凍血清時，請隨時將(jiang)之搖晃(huang)均勻，使溫(wen)度及(ji)成(cheng)分(fen)均一，減(jian)少沉淀的發生
3、請勿將血(xue)清(qing)(qing)(qing)置(zhi)于37。C太久。若在37。C放置(zhi)太久，血(xue)清(qing)(qing)(qing)會(hui)變得混濁，同時血(xue)清(qing)(qing)(qing)中許(xu)多(duo)較不(bu)穩定的(de)成(cheng)分(fen)也(ye)會(hui)因此(ci)受到損(sun)害，而影(ying)響(xiang)血(xue)清(qing)(qing)(qing)的(de)質量。
4、血清的熱(re)滅活非常容易(yi)造成(cheng)沉淀(dian)物的增多(duo)，若非必(bi)要，可以無須做(zuo)此步驟。
5、若必須做血清(qing)(qing)的(de)熱滅活，請遵守56。C，30分鐘的(de)原則，并(bing)且隨時搖晃(huang)均勻。溫度過高，時間過久或(huo)搖晃(huang)不均勻，都會造成沉(chen)淀物的(de)增多(duo)。血清(qing)(qing)解凍后發現有(you)絮(xu)狀沉(chen)淀物出現，該如何處理?　欲去(qu)(qu)除這些絮(xu)狀沉(chen)淀物，可(ke)以將(jiang)血清(qing)(qing)分裝至(zhi)無菌離心(xin)管(guan)內，以400g稍微離心(xin)，上清(qing)(qing)液(ye)即可(ke)接著加入(ru)培(pei)養(yang)基內一(yi)起過濾(lv)。但(dan)不建議以過濾(lv)的(de)方法去(qu)(qu)除這些絮(xu)狀沉(chen)淀物，因為它可(ke)能會阻塞過濾(lv)膜。

四、操作(zuo)流程
采(cai) 血(xue)：胎牛(niu)血(xue)清(qing)采用心臟穿刺(ci)的方法采血(xue)。馬血(xue)清(qing)采自供體動(dong)物。新(xin)生牛(niu)血(xue)清(qing)采自出(chu)生10至14天的(de)小牛。全部(bu)按照工業標準采血(xue)。
處 理：
全部血(xue)(xue)清：收集的(de)(de)血(xue)(xue)液(ye)均在冷藏條件下處理。血(xue)(xue)清和凝塊(kuai)分離后立即(ji)將血(xue)(xue)清合并并冷凍。只(zhi)有符(fu)合我(wo)們的(de)(de)檢(jian)測標準的(de)(de)血(xue)(xue)清才被接受作進一步處理。
熱滅活血清：熱滅活是在56℃水浴中(zhong)嚴(yan)格控溫30分鐘。
操作實驗中，血清(qing)有必要做熱滅活嗎?
實驗顯(xian)示，經過(guo)正確(que)處(chu)理的熱(re)滅活血(xue)清，對(dui)大多數的細胞(bao)而言是不(bu)需要的。經此處(chu)理過(guo)的血(xue)清對(dui)細胞(bao)的生長只有微小(xiao)的促(cu)進，或*沒有任何作用(yong)，甚(shen)至通常因為高溫(wen)處(chu)理影(ying)響了血(xue)清的質量，而造(zao)成(cheng)細胞(bao)生長速(su)率的
降低。而經過熱處理的血清，沉淀(dian)物的形成會顯(xian)著(zhu)的增多，這些沉淀(dian)物在倒立顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察，像是"小黑點(dian)"，常(chang)常(chang)會讓研究者誤以為(wei)是血清遭受污染，而把血清放(fang)在(zai)37C環境中，又會使此沉淀物更(geng)增(zeng)多，使研究者誤認(ren)為(wei)是微生(sheng)物的分裂擴增(zeng)。因此我們建議(yi)您(nin)，若非必(bi)須，您(nin)可以不需要做熱處理這一步。如此一來，不但(dan)節省您(nin)寶貴的時間，更(geng)確(que)保(bao)您(nin)血清的質(zhi)量!

另外(wai)，購(gou)買(mai)(mai)已滅(mie)活成品也不(bu)失(shi)一個捷(jie)徑(jing)，請(qing)在購(gou)買(mai)(mai)的(de)時候注意(yi)詢問廠(chang)家是(shi)否是(shi)已滅(mie)活血清要作(zuo)用
解凍(dong)血清時，請(qing)按(an)照所建議的逐步解凍(dong)法(-2O。C至4。C至室(shi)溫(wen))，若血清解凍(dong)時改變的溫(wen)度太大(da)(如-20。C至37。C)，實驗顯示非常(chang)容易產生沉(chen)淀物。
五、GIBCO, 不含丙酮酸鈉血清相關產(chan)品推薦