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ELISA試劑盒實驗的結果判斷方法

更新時間:2018-12-26   點擊次數:1324次

    要完成(cheng)一項(xiang)漂(piao)亮(liang)的(de)ELISA實(shi)驗(yan),不光要做足實(shi)驗(yan)的(de)準備(bei),還要熟練(lian)掌(zhang)握(wo)操作(zuo)方法及技巧,后就(jiu)是(shi)實(shi)驗(yan)的(de)結果(guo)了。那么(me)ELISA試劑盒實(shi)驗(yan)的(de)結果(guo)如何判斷分析呢?


1.儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2.以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的IFN-Y標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的IFN-Y含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
3.檢測值范圍:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml


    ELISA的試(shi)驗結果可用(yong)肉眼觀(guan)察(cha)顏色反應(ying)的深淺作出判斷,也可用(yong)分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計作測定。當然(ran),后者更為(wei)正確。而肉眼觀(guan)察(cha)更為(wei)簡(jian)便,而且也有一定正確性(xing)。據Adler(1980)報(bao)告(gao),目(mu)測為(wei)±1+、2+、3+、4+相當于分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計測定O.D值(zhi)。


    不論用哪種方法判定結果,每次都要有陽性和陰性參考血清作對照,這樣可以消除一些外界的影響因素。
≤0.04“±”     0.06~0.092和0.08~0.25“+”
0.26~0.5“++”  0.51~1.0“+++”    > 1.0“++++”