ELISA試劑盒在收(shou)集樣(yang)本前都(dou)必(bi)須有(you)一個完整的(de)計劃,必(bi)須清楚要檢測的(de)成份是(shi)否(fou)足夠穩定。對收(shou)集后當(dang)天就進行檢測的(de)樣(yang)本,及時(shi)儲存(cun)在4℃備(bei)用(yong)(yong)。對于隔天再檢測的(de)樣(yang)本ELISA試劑盒,及時(shi)分裝后凍存(cun)在-20℃備(bei)用(yong)(yong),有(you)條件的(de),-70℃凍存(cun)備(bei)用(yong)(yong)。標本應(ying)避免(mian)反復凍融。
ELISA試劑盒液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。ELISA試劑盒保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6. 組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。ELISA試劑盒用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取ELISA試劑盒, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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