【產品名稱】：nNOS,豬神經型一氧化氮合成酶ELISA試劑盒

【檢測方(fang)法(fa)】：酶聯免疫(yi)法(fa)/酶免法(fa)(ELISA)

【產(chan)品性狀】：96T，盒裝(zhuang)液體

【貯    藏(zang)】：2-8°C

【有 效 期(qi)】：Elisa試(shi)劑盒二年，我(wo)公司Elisa試(shi)劑盒均為(wei)批次，可放心購買。

【主要(yao)成分】：酶(mei)標板,試劑,標準品(pin)等。

【標    本(ben)】：血清/血漿(jiang)/細(xi)胞培(pei)養(yang)上清液(ye)/組織(zhi)勻漿(jiang)/組織(zhi)液(ye)/尿液(ye)/分泌物

【質量(liang)承諾】：我們(men)堅(jian)持對產品質量(liang)作不斷(duan)的(de)評估、創新和改(gai)善以確(que)保您對我們(men)產品的(de)高(gao)度信任。

【待檢樣本(ben)】：體(ti)液(ye)、血清、血漿(jiang)(jiang)、細胞培養上清液(ye)、尿液(ye)、組織勻漿(jiang)(jiang)、心房(fang)水標本(ben)等

【樣品采集(ji)】：Elisa試劑盒收集(ji)標(biao)本(ben)(ben)(ben)前必須清楚要檢測的成(cheng)份是否足(zu)夠穩定。對(dui)收集(ji)后(hou)當(dang)天進行檢測的標(biao)本(ben)(ben)(ben)，儲存(cun)(cun)在(zai)4℃備用，如有特殊原因需(xu)要周期收集(ji)標(biao)本(ben)(ben)(ben)，將標(biao)本(ben)(ben)(ben)及時分裝后(hou)放(fang)在(zai)-20℃或-70℃條件下保(bao)存(cun)(cun)。避免反(fan)復凍融(rong)。標(biao)本(ben)(ben)(ben)2-8℃可保(bao)存(cun)(cun)48小時，-20℃可保(bao)存(cun)(cun)1個月。-70℃可保(bao)存(cun)(cun)6個月。部分激素類標(biao)本(ben)(ben)(ben)需(xu)添加抑肽酶(mei)。

【保 質 期】：半(ban)年(六個月)

一、“nNOS,豬神經型一氧化氮合成酶ELISA試劑盒”特點(dian)概述

1.專一(yi)性(xing)強。抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)與抗(kang)(kang)(kang)體的免(mian)(mian)疫反(fan)應(ying)(ying)是(shi)專一(yi)反(fan)應(ying)(ying)，而免(mian)(mian)疫酶技(ji)術以免(mian)(mian)疫反(fan)應(ying)(ying)為基礎，所檢測的對象是(shi)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(或抗(kang)(kang)(kang)體)，使(shi)用的抗(kang)(kang)(kang)體除標記了酶以外(wai)，與普通抗(kang)(kang)(kang)體的免(mian)(mian)疫反(fan)應(ying)(ying)特性(xing)并無(wu)多大(da)差別。

2.靈敏(min)度高。由(you)于抗體(ti)聯結(jie)上了(le)酶(mei)，因此，借助于酶(mei)與(yu)底(di)物的(de)顯(xian)色反(fan)應(ying)，顯(xian)示抗原與(yu)抗體(ti)的(de)結(jie)合，大大提高了(le)檢(jian)測(ce)的(de)靈敏(min)性，使檢(jian)測(ce)水平(ping)接近放射免疫測(ce)定法。

3.樣品易(yi)保(bao)存。經過酶反應(ying)顯(xian)示的(de)有色產物大多比(bi)較穩定，因此有利于(yu)樣品的(de)保(bao)存。

4.結果易觀察(cha)(cha)(cha)。對檢測結果即可用(yong)(yong)肉眼(yan)觀察(cha)(cha)(cha)，又可用(yong)(yong)顯微(wei)鏡(jing)觀察(cha)(cha)(cha)，也可以用(yong)(yong)分光光度計進行比(bi)色(se)測定，還可用(yong)(yong)顯微(wei)鏡(jing)觀察(cha)(cha)(cha)。這是因為(wei)某(mou)些酶反應產物(wu)能使(shi)電(dian)子密(mi)度發生改變，從而引起被(bei)檢測物(wu)的顯示。

5.可(ke)以定量測定。溶液中的(de)抗原(yuan)物質，應用酶免吸附技術(shu)進行(xing)比色測定，依據光(guang)密度值的(de)變化，可(ke)以定量。預計用細(xi)胞分光(guang)光(guang)度計可(ke)對組織(zhi)內的(de)抗原(yuan)進行(xing)免疫酶技術(shu)的(de)定量測定。

6.可以大規模測(ce)定樣品(pin)。如有成千(qian)上萬(wan)份樣品(pin)需要進行檢測(ce)，免疫酶(mei)技術(shu)都能在較短時(shi)間內完成。

7.儀(yi)器(qi)和試(shi)劑(ji)(ji)(ji)簡單。對免疫沒技術來說，不需要(yao)(yao)熒光顯微(wei)鏡，也(ye)不需要(yao)(yao)測定(ding)放射性的特殊儀(yi)器(qi)，所用儀(yi)器(qi)及(ji)試(shi)劑(ji)(ji)(ji)均屬一般性儀(yi)器(qi)與試(shi)劑(ji)(ji)(ji)，普(pu)通實驗(yan)室及(ji)生產應用單位均易購置

6、*，質量保證，最大限度的節省實驗經費。

二、ELISA試劑盒檢測概述
    ELISA（酶聯接免疫吸附反應分析）是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。
實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。
三、實驗過程：

1.  試劑準備(bei)：所有試劑都必須(xu)在使用(yong)前達到(dao)室溫，使用(yong)后(hou)請立即按照說明書要求(qiu)保存(cun)試劑。  實驗操(cao)作(zuo)中(zhong)請使用(yong)一(yi)次性的吸頭(tou)，避(bi)免交叉污染。

2.   加樣(yang)(yang)：加樣(yang)(yang)或加試劑時，請注意在吸取標(biao)(biao)本(ben)(ben) / 標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)，酶結合物或底物時，*個孔與最(zui)后一個孔加樣(yang)(yang)之間的(de)時間間隔如果太大，將會導致不同的(de) “預孵育"時間，從而明(ming)顯地影響到測量值的(de)準(zhun)確性及重復性。一次加樣(yang)(yang)時間(包括標(biao)(biao)準(zhun)品(pin)及所(suo)有樣(yang)(yang)品(pin))控制在10分(fen)鐘內，如標(biao)(biao)本(ben)(ben)數量多，推薦使用多道(dao)移液器加樣(yang)(yang)。

3.   孵(fu)育：為防止樣品蒸發，試驗時(shi)將反(fan)應(ying)(ying)板(ban)放于(yu)鋪有濕布(bu)的密閉盒內，酶(mei)標板(ban)加上蓋(gai)或覆(fu)膜，以(yi)避免(mian)液體蒸發；洗板(ban)后應(ying)(ying)盡快進(jin)行下步(bu)操作，任何(he)時(shi)侯都(dou)應(ying)(ying)避免(mian)酶(mei)標板(ban)處(chu)于(yu)干燥(zao)狀態;同時(shi)應(ying)(ying)嚴格遵守給定的孵(fu)育時(shi)間和溫(wen)度。

4.   洗(xi)滌(di)(di)：洗(xi)滌(di)(di)過程中反應孔中殘留(liu)的(de)洗(xi)滌(di)(di)液應在(zai)濾(lv)紙上充分拍干，勿將濾(lv)紙直(zhi)接(jie)放(fang)入反應孔中吸水，同時(shi)要消除板底(di)殘留(liu)的(de)液體和手指印，避免影(ying)響(xiang)最后的(de)酶標儀讀數。

四、常見問題解答

小編(bian)簡單整(zheng)理了(le)5個問題，具體內容(rong)如下(xia)：

1、一個ELISA試劑盒檢測(ce)幾個樣品？

小編自己在各大論壇看到最多(duo)的三個答案：

1）48T 可(ke)做42個樣本加6個標(biao)準(zhun)曲線；96T 可(ke)做90個樣本加6個標(biao)準(zhun)曲線

2）以96T試(shi)劑(ji)盒(he)來算，定(ding)量的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)一(yi)般可以做90個左右(you)的(de)樣品，定(ding)性的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)可以做94個左右(you)的(de)樣品

3）96T的(de)ELISA試劑(ji)盒，去除標準品復(fu)孔檢(jian)測，最(zui)多(duo)(duo)還能檢(jian)測80個(ge)標本；48T的(de)最(zui)多(duo)(duo)30個(ge)樣(yang)本。

2、elisa試劑(ji)盒96T的能做檢測多少血(xue)清樣品？板能重(zhong)復利用嗎？

96T，一(yi)般做復孔(kong)(kong)的(de)話，做標準曲線需要16個(ge)(ge)孔(kong)(kong)，剩下80個(ge)(ge)孔(kong)(kong)就可以做40個(ge)(ge)樣本。這個(ge)(ge)板不能重復利(li)用。而且(qie)配(pei)套的(de)試劑也只是夠一(yi)塊(kuai)板子用的(de)。

3、想請教(jiao)一下，我想用(yong)elisa法測血清里的(de)(de)一種(zhong)抗(kang)原，查(cha)(cha)了(le)資料(liao)，發現(xian)沒(mei)有現(xian)成的(de)(de)試劑(ji)盒(he)用(yong)，現(xian)在就(jiu)有2種(zhong)備選方(fang)案，一種(zhong)是買抗(kang)體對自(zi)己包被(bei)（查(cha)(cha)了(le)R&D等大公司都沒(mei)有可用(yong)于(yu)elisa的(de)(de)單抗(kang)）。哪種(zhong)比(bi)較好呢？自(zi)己包被(bei)的(de)(de)會不會比(bi)國產的(de)(de)試劑(ji)盒(he)可靠呢？

如果(guo)你覺(jue)得技(ji)術不錯有隊其他公司不放(fang)心(xin)(xin)，可(ke)以自己(ji)購買抗體對自己(ji)包被，這個就(jiu)是麻(ma)煩點，自己(ji)包被用(yong)著放(fang)心(xin)(xin)，舒(shu)心(xin)(xin)；

4、western 和(he)ELISA 處理樣本有何差別(bie)？

Western Blot 樣(yang)品(pin)制(zhi)備要加蛋(dan)白(bai)裂(lie)解液(ye)（含(han)有蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制(zhi)劑(ji)），然后(hou)冰上研磨，收集于EP管(guan)，冰上裂(lie)解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋(dan)白(bai)樣(yang)品(pin)。建議直接電泳，多余的(de)-80保存。建議分裝的(de)蛋(dan)白(bai)每(mei)支(zhi)略多于一次上樣(yang)量，一次性(xing)用完(wan)一支(zhi)，避免反復凍融。

ELISA樣(yang)品，直(zhi)接腦組織(zhi)冰(bing)上勻漿，收(shou)集于EP管，同上一樣(yang)離心，大(da)約220-250ul每(mei)支分(fen)裝(zhuang)（因為(wei)ELISA上樣(yang)量基本都(dou)是每(mei)孔(kong)(kong)100ul，做復孔(kong)(kong)，每(mei)個樣(yang)品2孔(kong)(kong)，就需要(yao)200ul，為(wei)了避免(mian)(mian)不(bu)夠2孔(kong)(kong)，分(fen)裝(zhuang)時要(yao)大(da)于200ul每(mei)支），直(zhi)接實驗。多余的-80保存，一樣(yang)避免(mian)(mian)反(fan)復凍融。

不過(guo)ELISA少量樣品進行預實驗，或(huo)者查閱文獻，看看大概組織里(li)有多高(gao)濃(nong)(nong)度，選(xuan)擇合適的試劑(ji)(ji)盒，測(ce)(ce)量范圍(wei)要與(yu)組織濃(nong)(nong)度相(xiang)符。避免濃(nong)(nong)度過(guo)高(gao)測(ce)(ce)量不準(zhun)，或(huo)者濃(nong)(nong)度過(guo)低，小于(yu)試劑(ji)(ji)盒zui低可測(ce)(ce)濃(nong)(nong)度。

5、Elisa試劑盒(he)該(gai)買哪家公(gong)司的(de)呢？

提出(chu)這個問題的(de)(de)朋友其實該打，目前(qian)國(guo)際上各個品(pin)牌(pai)的(de)(de)試劑盒生廠商，都會(hui)有其偏重點，像BIM、R&D等品(pin)牌(pai)在細(xi)胞因子(zi)方面的(de)(de)試劑盒就非(fei)常好，而(er)其他(ta)牌(pai)子(zi)也(ye)一樣的(de)(de)。

Bender：粘附分子方(fang)面(mian)的試劑盒；

Cayman：花生四烯酸類產(chan)品的試劑盒(he)；

Merck(Linco)：內分泌研(yan)究(jiu)方面的試劑盒；