【產品名稱】：HPS,豬副豬嗜血桿菌ELISA試劑盒

【檢測方法】：酶聯免疫法/酶免法(ELISA)

【產品(pin)性狀】：96T，盒裝液體

【貯    藏】：2-8°C

【有 效 期】：Elisa試劑(ji)盒二年，我公司Elisa試劑(ji)盒均為批次，可(ke)放心購買。

【主要成分】：酶(mei)標(biao)板,試劑,標(biao)準品等。

【標    本(ben)】：血清/血漿/細胞(bao)培養上清液(ye)/組織勻漿/組織液(ye)/尿(niao)液(ye)/分泌物

【質量承諾】：我們(men)堅持(chi)對產品質量作不斷的評(ping)估、創新和改善以(yi)確(que)保您對我們(men)產品的高(gao)度(du)信任。

【待檢樣(yang)本】：體液、血(xue)清(qing)、血(xue)漿、細胞培養上清(qing)液、尿液、組織勻漿、心房水(shui)標(biao)本等

【樣品采集】：Elisa試劑盒收(shou)集標(biao)本前(qian)必須清楚(chu)要(yao)(yao)檢測的(de)成(cheng)份是否(fou)足(zu)夠(gou)穩定。對收(shou)集后當天進行檢測的(de)標(biao)本，儲存在4℃備用，如有特殊原因(yin)需要(yao)(yao)周期收(shou)集標(biao)本，將標(biao)本及時(shi)分裝(zhuang)后放在-20℃或-70℃條件下(xia)保存。避免(mian)反復凍融。標(biao)本2-8℃可保存48小時(shi)，-20℃可保存1個月(yue)。-70℃可保存6個月(yue)。部(bu)分激素類標(biao)本需添加抑肽酶。

【保(bao) 質 期】：半年(六(liu)個月)

一、“HPS,豬副豬嗜血桿菌ELISA試劑盒”特點概述(shu)

1.專(zhuan)一性強。抗(kang)(kang)原與(yu)抗(kang)(kang)體(ti)的免(mian)疫反應是專(zhuan)一反應，而(er)免(mian)疫酶技術以(yi)免(mian)疫反應為基(ji)礎，所檢測(ce)的對象是抗(kang)(kang)原(或抗(kang)(kang)體(ti))，使用(yong)的抗(kang)(kang)體(ti)除(chu)標(biao)記了酶以(yi)外，與(yu)普通抗(kang)(kang)體(ti)的免(mian)疫反應特性并無多(duo)大差別(bie)。

2.靈敏度高。由(you)于抗(kang)體(ti)(ti)聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗(kang)原與抗(kang)體(ti)(ti)的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使(shi)檢測水(shui)平接近放射(she)免(mian)疫測定法。

3.樣品易保(bao)存(cun)。經過酶反(fan)應顯示的有(you)色產物(wu)大多比(bi)較(jiao)穩定，因此有(you)利于樣品的保(bao)存(cun)。

4.結(jie)果易觀(guan)(guan)察(cha)(cha)。對檢(jian)測結(jie)果即可(ke)用(yong)(yong)肉(rou)眼觀(guan)(guan)察(cha)(cha)，又可(ke)用(yong)(yong)顯(xian)微鏡觀(guan)(guan)察(cha)(cha)，也可(ke)以用(yong)(yong)分光光度(du)計進行比色測定(ding)，還可(ke)用(yong)(yong)顯(xian)微鏡觀(guan)(guan)察(cha)(cha)。這(zhe)是因為某些酶反應產物能使電(dian)子密度(du)發生改變，從而引起被檢(jian)測物的(de)顯(xian)示(shi)。

5.可以定(ding)量測定(ding)。溶液(ye)中(zhong)的抗原物質(zhi)，應用酶免吸附技(ji)術進行比色測定(ding)，依(yi)據光密度值的變化，可以定(ding)量。預(yu)計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技(ji)術的定(ding)量測定(ding)。

6.可以大規模測定樣品(pin)。如有成千(qian)上萬(wan)份(fen)樣品(pin)需要進行檢測，免疫(yi)酶技(ji)術都能(neng)在較短時(shi)間內完(wan)成。

7.儀(yi)器和試(shi)(shi)劑簡單。對免(mian)疫沒技術來說，不(bu)需要熒光(guang)顯微鏡，也(ye)不(bu)需要測定放射(she)性(xing)的特殊儀(yi)器，所(suo)用儀(yi)器及試(shi)(shi)劑均屬一般性(xing)儀(yi)器與(yu)試(shi)(shi)劑，普(pu)通實驗室及生(sheng)產應用單位均易購置(zhi)

6、*，質量保證，最大限(xian)度(du)的節省實驗經(jing)費(fei)。

二、ELISA試劑盒檢測概述
    ELISA（酶聯接免疫吸附反應分析）是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。
實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即：用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。目前我們對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法服務。
三、實驗過程：

1.  試劑準備：所有試劑都必(bi)須在(zai)使用前達到室溫(wen)，使用后(hou)請立即按照說明書要求(qiu)保存試劑。  實驗操(cao)作中請使用一次性的吸頭，避(bi)免交叉污染。

2.   加樣(yang)(yang)：加樣(yang)(yang)或(huo)加試(shi)劑(ji)時，請注意在吸(xi)取標(biao)本 / 標(biao)準品(pin)，酶結(jie)合(he)物或(huo)底物時，*個孔(kong)(kong)與最后一個孔(kong)(kong)加樣(yang)(yang)之間(jian)(jian)的(de)(de)時間(jian)(jian)間(jian)(jian)隔如果太(tai)大，將(jiang)會導致不(bu)同的(de)(de) “預孵育"時間(jian)(jian)，從而明顯地影響(xiang)到(dao)測量值的(de)(de)準確(que)性(xing)(xing)及重復(fu)性(xing)(xing)。一次加樣(yang)(yang)時間(jian)(jian)(包括(kuo)標(biao)準品(pin)及所有樣(yang)(yang)品(pin))控制(zhi)在10分鐘內，如標(biao)本數量多，推薦使用多道(dao)移液器(qi)加樣(yang)(yang)。

3.   孵育：為(wei)防止樣品蒸發，試(shi)驗(yan)時(shi)將反應(ying)板放于(yu)鋪有濕布的密閉盒內，酶(mei)標(biao)板加上蓋或(huo)覆膜，以(yi)避免液體蒸發；洗(xi)板后應(ying)盡快(kuai)進行下(xia)步操作(zuo)，任何時(shi)侯(hou)都應(ying)避免酶(mei)標(biao)板處于(yu)干(gan)燥(zao)狀態;同時(shi)應(ying)嚴格(ge)遵守給定的孵育時(shi)間和溫(wen)度。

4.   洗滌(di)：洗滌(di)過程中反應(ying)(ying)(ying)孔中殘(can)(can)留(liu)的洗滌(di)液應(ying)(ying)(ying)在濾(lv)紙上充分拍干，勿將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接放(fang)入反應(ying)(ying)(ying)孔中吸(xi)水(shui)，同時要消(xiao)除板底殘(can)(can)留(liu)的液體(ti)和手指印，避(bi)免影響最后的酶(mei)標(biao)儀讀數。

四、常見(jian)問題(ti)解答

小(xiao)編簡單整理了5個問題，具(ju)體(ti)內容(rong)如(ru)下：

1、一個ELISA試劑盒檢(jian)測幾個樣品？

小編自(zi)己在各大論壇看到最多的三(san)個答案：

1）48T 可做(zuo)42個樣(yang)本加6個標準(zhun)曲(qu)線；96T 可做(zuo)90個樣(yang)本加6個標準(zhun)曲(qu)線

2）以(yi)96T試劑盒來算(suan)，定量的(de)試劑盒一般可(ke)以(yi)做(zuo)90個(ge)左右(you)的(de)樣品(pin)，定性(xing)的(de)試劑盒可(ke)以(yi)做(zuo)94個(ge)左右(you)的(de)樣品(pin)

3）96T的ELISA試劑盒(he)，去除(chu)標準品復孔(kong)檢測(ce)，最(zui)多還能檢測(ce)80個標本；48T的最(zui)多30個樣本。

2、elisa試(shi)劑盒(he)96T的能(neng)做檢測多少血清(qing)樣品？板能(neng)重復(fu)利用嗎？

96T，一般做(zuo)(zuo)復(fu)孔(kong)的話，做(zuo)(zuo)標(biao)準曲線需要16個(ge)孔(kong)，剩下80個(ge)孔(kong)就可以做(zuo)(zuo)40個(ge)樣本。這(zhe)個(ge)板不能重(zhong)復(fu)利(li)用。而(er)且配套的試劑也只是夠一塊板子(zi)用的。

3、想請教一下(xia)，我想用(yong)elisa法測血清里的(de)一種抗原，查(cha)了資(zi)料，發(fa)現沒有現成的(de)試劑(ji)盒用(yong)，現在(zai)就有2種備選方案，一種是(shi)買抗體對自(zi)己包被(bei)(bei)（查(cha)了R&D等大公(gong)司(si)都沒有可用(yong)于(yu)elisa的(de)單抗）。哪種比較好(hao)呢(ni)？自(zi)己包被(bei)(bei)的(de)會不會比國產的(de)試劑(ji)盒可靠呢(ni)？

如果(guo)你覺(jue)得(de)技術不(bu)錯(cuo)有隊(dui)其他(ta)公司不(bu)放(fang)心(xin)，可以(yi)自(zi)己(ji)購買(mai)抗體對自(zi)己(ji)包被，這個就是麻煩點(dian)，自(zi)己(ji)包被用著放(fang)心(xin)，舒心(xin)；

4、western 和ELISA 處理樣本有何(he)差別？

Western Blot 樣(yang)品制(zhi)備要(yao)加(jia)蛋白(bai)裂(lie)解(jie)液（含(han)有蛋白(bai)酶抑制(zhi)劑(ji)），然后冰(bing)上(shang)研磨，收(shou)集于(yu)EP管，冰(bing)上(shang)裂(lie)解(jie)30min，4度12000rpm離心15min，取上(shang)清分(fen)裝，即得到蛋白(bai)樣(yang)品。建議直接電泳，多余的-80保存(cun)。建議分(fen)裝的蛋白(bai)每支略多于(yu)一次(ci)上(shang)樣(yang)量(liang)，一次(ci)性用(yong)完一支，避免反(fan)復凍(dong)融。

ELISA樣(yang)品，直接腦組織(zhi)冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣(yang)離心，大(da)約(yue)220-250ul每支(zhi)分(fen)(fen)裝（因為(wei)ELISA上樣(yang)量基本都是每孔100ul，做復(fu)孔，每個樣(yang)品2孔，就需要200ul，為(wei)了避免不夠2孔，分(fen)(fen)裝時要大(da)于200ul每支(zhi)），直接實驗。多余的-80保存，一樣(yang)避免反(fan)復(fu)凍融。

不過ELISA少(shao)量樣(yang)品進行(xing)預實驗(yan)，或(huo)(huo)者(zhe)查閱文獻，看(kan)看(kan)大概組(zu)(zu)織(zhi)里有多高濃度(du)，選擇合適的(de)試劑盒(he)，測(ce)量范圍要與組(zu)(zu)織(zhi)濃度(du)相(xiang)符(fu)。避免濃度(du)過高測(ce)量不準，或(huo)(huo)者(zhe)濃度(du)過低(di)(di)，小于試劑盒(he)zui低(di)(di)可(ke)測(ce)濃度(du)。

5、Elisa試劑盒該買哪家公(gong)司的呢？

提(ti)出這個問題的(de)(de)朋友(you)其(qi)實該打，目前國際(ji)上各個品牌的(de)(de)試(shi)劑盒生(sheng)廠(chang)商，都會有其(qi)偏重點，像(xiang)BIM、R&D等品牌在(zai)細胞因子方(fang)面的(de)(de)試(shi)劑盒就非常(chang)好(hao)，而(er)其(qi)他牌子也一樣的(de)(de)。

Bender：粘附(fu)分子方(fang)面(mian)的(de)試劑(ji)盒；

Cayman：花生四烯(xi)酸(suan)類產(chan)品的(de)試劑(ji)盒；

Merck(Linco)：內分泌(mi)研究方(fang)面的試劑盒(he)；