【產品名稱】：IL-17B,人白細胞介素17BELISA試劑盒原理

【檢測(ce)方(fang)法(fa)】：酶聯(lian)免疫法(fa)/酶免法(fa)(ELISA)

【產品性狀】：96T/48T，盒裝(zhuang)液體

【貯    藏】：2-8°C

【有 效 期】：Elisa試劑盒二(er)年，我公司Elisa試(shi)劑(ji)盒(he)均為批次(ci)，可放心購買(mai)。

【主要成分】：酶標(biao)板(ban),試(shi)劑,標(biao)準品等。

【標(biao)    本(ben)】：血清/血漿(jiang)/細(xi)胞(bao)培養(yang)上清液/組織勻漿(jiang)/組織液/尿液/分(fen)泌物

【質(zhi)量承諾】：我們(men)堅持對產(chan)品質(zhi)量作不斷(duan)的評估、創新(xin)和改善以確(que)保您對我們(men)產(chan)品的高度信任。

【待檢樣本】：體(ti)液(ye)、血清、血漿、細胞培養(yang)上清液(ye)、尿(niao)液(ye)、組織勻漿、心房(fang)水標本等

【樣品采集】：Elisa試劑盒收集(ji)標(biao)(biao)本(ben)(ben)前必須(xu)清楚要檢(jian)測(ce)的成(cheng)份是(shi)否(fou)足(zu)夠穩(wen)定。對收集(ji)后當天(tian)進(jin)行檢(jian)測(ce)的標(biao)(biao)本(ben)(ben)，儲存(cun)在4℃備(bei)用，如(ru)有特殊原因需(xu)要周期收集(ji)標(biao)(biao)本(ben)(ben)，將標(biao)(biao)本(ben)(ben)及(ji)時(shi)分裝后放在-20℃或-70℃條(tiao)件(jian)下保(bao)(bao)存(cun)。避免(mian)反復凍融(rong)。標(biao)(biao)本(ben)(ben)2-8℃可保(bao)(bao)存(cun)48小時(shi)，-20℃可保(bao)(bao)存(cun)1個月。-70℃可保(bao)(bao)存(cun)6個月。部分激素(su)類標(biao)(biao)本(ben)(ben)需(xu)添(tian)加抑肽酶。

【保 質(zhi) 期】：半年(六(liu)個(ge)月)

一、“IL-17B,人白細胞介素17BELISA試劑盒原理”特點概述

1.專一性強。抗(kang)(kang)原(yuan)與抗(kang)(kang)體的(de)(de)免(mian)(mian)疫反(fan)應(ying)是專一反(fan)應(ying)，而免(mian)(mian)疫酶技術以免(mian)(mian)疫反(fan)應(ying)為基礎，所檢(jian)測的(de)(de)對象(xiang)是抗(kang)(kang)原(yuan)(或(huo)抗(kang)(kang)體)，使用的(de)(de)抗(kang)(kang)體除(chu)標記(ji)了酶以外，與普通抗(kang)(kang)體的(de)(de)免(mian)(mian)疫反(fan)應(ying)特性并無多大差別。

2.靈敏(min)度高。由于抗體(ti)(ti)聯結(jie)上了(le)酶(mei)(mei)，因此，借助于酶(mei)(mei)與底物的(de)顯色反應，顯示抗原與抗體(ti)(ti)的(de)結(jie)合，大大提高了(le)檢(jian)測(ce)的(de)靈敏(min)性，使檢(jian)測(ce)水平接近放射免(mian)疫測(ce)定(ding)法(fa)。

3.樣(yang)品易保存。經過酶反應顯示的(de)有色產物大多比較穩(wen)定，因(yin)此有利于樣(yang)品的(de)保存。

4.結果(guo)易觀(guan)察(cha)。對檢測(ce)結果(guo)即可(ke)用(yong)肉眼觀(guan)察(cha)，又可(ke)用(yong)顯(xian)微鏡觀(guan)察(cha)，也(ye)可(ke)以用(yong)分(fen)光光度計進行(xing)比色測(ce)定，還(huan)可(ke)用(yong)顯(xian)微鏡觀(guan)察(cha)。這是因為某些(xie)酶(mei)反應(ying)產物能使電(dian)子(zi)密度發生改(gai)變(bian)，從而引起被檢測(ce)物的顯(xian)示。

5.可以定量(liang)(liang)測定。溶液中(zhong)的(de)(de)抗原物(wu)質，應用(yong)酶免(mian)吸(xi)附(fu)技術進(jin)行(xing)比色測定，依據光(guang)密度值的(de)(de)變化(hua)，可以定量(liang)(liang)。預計(ji)用(yong)細(xi)胞分光(guang)光(guang)度計(ji)可對組織(zhi)內的(de)(de)抗原進(jin)行(xing)免(mian)疫酶技術的(de)(de)定量(liang)(liang)測定。

6.可以大規模測定樣(yang)品。如有成千上萬份(fen)樣(yang)品需要進行檢測，免疫(yi)酶技術都能在較短時(shi)間(jian)內(nei)完(wan)成。

7.儀器(qi)和(he)試劑(ji)簡單(dan)。對(dui)免疫沒技術來說，不(bu)需(xu)要熒(ying)光顯(xian)微鏡，也不(bu)需(xu)要測定放射性(xing)的(de)特(te)殊(shu)儀器(qi)，所(suo)用儀器(qi)及(ji)試劑(ji)均屬一般性(xing)儀器(qi)與(yu)試劑(ji)，普通實驗室及(ji)生產應用單(dan)位均易購置

6、*，質量保(bao)證，最大(da)限(xian)度的節(jie)省實驗經費(fei)。

二、ELISA試劑盒檢測概述
    ELISA（酶聯接(jie)免(mian)疫吸附(fu)反應(ying)(ying)分析）是以免(mian)疫學反應(ying)(ying)為基礎(chu)，將抗原、抗體(ti)的(de)特(te)異性反應(ying)(ying)與(yu)酶對底物(wu)的(de)高效催化作用相結(jie)合起來的(de)一種(zhong)敏(min)感性很高的(de)實(shi)驗(yan)技術。 由于抗原、抗體(ti)的(de)反應(ying)(ying)在(zai)一種(zhong)固(gu)相載體(ti)-聚苯乙烯微量滴定板的(de)孔中(zhong)進行，每加入一種(zhong)試(shi)劑孵育后，可通過洗滌除去多余的(de)游離反應(ying)(ying)物(wu)，從而保證試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)的(de)特(te)異性與(yu)穩定性。
實際(ji)應用(yong)中，通(tong)過不同的設計，具(ju)體(ti)的方法(fa)(fa)步驟(zou)可(ke)有多種。即：用(yong)于檢測(ce)抗(kang)(kang)體(ti)的間接(jie)法(fa)(fa)、用(yong)于檢測(ce)抗(kang)(kang)原(yuan)的雙抗(kang)(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)法(fa)(fa)以及用(yong)于檢測(ce)小分子抗(kang)(kang)原(yuan)或半(ban)抗(kang)(kang)原(yuan)的抗(kang)(kang)原(yuan)競爭法(fa)(fa)等等。目(mu)前(qian)我們對客(ke)戶提(ti)供比較(jiao)常用(yong)的ELISA雙抗(kang)(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)法(fa)(fa)及ELISA間接(jie)法(fa)(fa)服務。
三(san)、實驗過程：

1.  試(shi)劑準備：所有試(shi)劑都必(bi)須在使(shi)用(yong)前達到(dao)室溫，使(shi)用(yong)后請立即(ji)按(an)照說明書要求保(bao)存試(shi)劑。  實(shi)驗操作中請使(shi)用(yong)一(yi)次性(xing)的吸頭，避免交叉污染(ran)。

2.   加(jia)(jia)(jia)樣(yang)：加(jia)(jia)(jia)樣(yang)或加(jia)(jia)(jia)試(shi)劑時，請注意(yi)在(zai)吸取標本 / 標準品(pin)(pin)，酶(mei)結(jie)合物或底物時，*個孔與最后一(yi)個孔加(jia)(jia)(jia)樣(yang)之間的(de)時間間隔如果太大，將會(hui)導致不(bu)同的(de) “預孵育"時間，從而(er)明顯地(di)影響到測(ce)量值的(de)準確性及重復性。一(yi)次加(jia)(jia)(jia)樣(yang)時間(包括標準品(pin)(pin)及所有樣(yang)品(pin)(pin))控(kong)制在(zai)10分鐘內，如標本數量多(duo)，推(tui)薦使用多(duo)道移(yi)液(ye)器加(jia)(jia)(jia)樣(yang)。

3.   孵育：為防止(zhi)樣品蒸(zheng)發(fa)，試(shi)驗時將(jiang)反(fan)應(ying)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nei)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸(zheng)發(fa)；洗板后(hou)應(ying)盡快進行下步(bu)操作，任何時侯(hou)都應(ying)避免酶標板處于干燥狀態;同時應(ying)嚴格(ge)遵守(shou)給定的孵育時間和溫度。

4.   洗滌(di)(di)：洗滌(di)(di)過程中(zhong)反應孔中(zhong)殘(can)留的洗滌(di)(di)液(ye)應在濾(lv)紙上充分拍干，勿(wu)將濾(lv)紙直接放入反應孔中(zhong)吸水，同時要消除板底殘(can)留的液(ye)體和手指印，避(bi)免(mian)影(ying)響最后(hou)的酶標儀讀數。

四、常見問題解(jie)答

小編簡單整理了5個問題，具體(ti)內容如下：

1、一個ELISA試劑盒檢測幾個樣品？

小(xiao)編自(zi)己在各大(da)論(lun)壇看到zui多的三個答案：

1）48T 可做42個(ge)(ge)樣本(ben)加6個(ge)(ge)標(biao)準曲線(xian)；96T 可做90個(ge)(ge)樣本(ben)加6個(ge)(ge)標(biao)準曲線(xian)

2）以(yi)96T試(shi)劑(ji)盒(he)(he)(he)來算，定量(liang)的(de)(de)試(shi)劑(ji)盒(he)(he)(he)一般可以(yi)做90個(ge)左(zuo)右的(de)(de)樣品，定性的(de)(de)試(shi)劑(ji)盒(he)(he)(he)可以(yi)做94個(ge)左(zuo)右的(de)(de)樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標準(zhun)品復孔(kong)檢(jian)測，zui多(duo)還能檢(jian)測80個(ge)標本；48T的zui多(duo)30個(ge)樣(yang)本。

2、elisa試(shi)劑盒96T的(de)能做檢測多少血清樣品(pin)？板能重復利用嗎？

96T，一(yi)般做(zuo)復孔(kong)的(de)話，做(zuo)標準(zhun)曲線需要16個孔(kong)，剩下80個孔(kong)就可以做(zuo)40個樣本。這個板不能重復利用。而且(qie)配(pei)套的(de)試劑也只(zhi)是(shi)夠一(yi)塊板子用的(de)。

3、想請(qing)教(jiao)一下，我想用(yong)elisa法(fa)測血清里(li)的一種(zhong)抗(kang)(kang)原，查(cha)了資料，發(fa)現(xian)沒有現(xian)成(cheng)的試劑盒用(yong)，現(xian)在就有2種(zhong)備選(xuan)方案，一種(zhong)是買抗(kang)(kang)體(ti)對(dui)自己包被(bei)（查(cha)了R&D等大公司(si)都沒有可(ke)用(yong)于elisa的單(dan)抗(kang)(kang)）。哪種(zhong)比較好呢？自己包被(bei)的會不會比國產的試劑盒可(ke)靠呢？

如(ru)果你覺得技術(shu)不錯有隊(dui)其他公司不放心，可以(yi)自(zi)己購買抗體對自(zi)己包被，這個就是麻(ma)煩點，自(zi)己包被用著放心，舒(shu)心；

4、western 和(he)ELISA 處理樣(yang)本有何差(cha)別？

Western Blot 樣品制(zhi)備(bei)要加蛋(dan)白(bai)裂(lie)解液(ye)（含有蛋(dan)白(bai)酶抑制(zhi)劑），然后冰上(shang)研磨，收集于(yu)EP管，冰上(shang)裂(lie)解30min，4度12000rpm離(li)心15min，取上(shang)清分(fen)裝(zhuang)，即得到(dao)蛋(dan)白(bai)樣品。建議(yi)直接電泳，多余的(de)-80保存(cun)。建議(yi)分(fen)裝(zhuang)的(de)蛋(dan)白(bai)每支略多于(yu)一次上(shang)樣量，一次性用完(wan)一支，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融。

ELISA樣(yang)(yang)品，直接(jie)腦組織(zhi)冰(bing)上勻漿，收(shou)集于EP管(guan)，同上一(yi)(yi)樣(yang)(yang)離心，大(da)約220-250ul每支分(fen)裝(zhuang)（因為ELISA上樣(yang)(yang)量基本都是每孔(kong)100ul，做復孔(kong)，每個樣(yang)(yang)品2孔(kong)，就需要200ul，為了避免不夠2孔(kong)，分(fen)裝(zhuang)時要大(da)于200ul每支），直接(jie)實驗。多余的-80保存，一(yi)(yi)樣(yang)(yang)避免反(fan)復凍融。

不過(guo)ELISA少(shao)量樣品進(jin)行預(yu)實(shi)驗，或者查閱文(wen)獻，看看大(da)概組織里有多(duo)高濃(nong)(nong)度(du)，選擇(ze)合適的(de)試劑(ji)盒，測(ce)量范圍(wei)要與組織濃(nong)(nong)度(du)相符(fu)。避免濃(nong)(nong)度(du)過(guo)高測(ce)量不準，或者濃(nong)(nong)度(du)過(guo)低，小于試劑(ji)盒最低可測(ce)濃(nong)(nong)度(du)。

5、Elisa試劑(ji)盒該買哪(na)家公司(si)的呢？

提出(chu)這(zhe)個問題的朋友(you)其(qi)(qi)實該(gai)打，目前國(guo)際上(shang)各(ge)個品牌的試劑盒生廠商，都會(hui)有(you)其(qi)(qi)偏重點，像BIM、R&D等(deng)品(pin)牌在細胞因子方(fang)面的試劑盒就非常好，而其他牌子也一樣的(de)。

Bender：粘附(fu)分子方面的試劑盒；

Cayman：花生四烯酸類產(chan)品的試劑盒(he)；

Merck(Linco)：內分泌(mi)研究方面(mian)的試劑盒(he)；