【產(chan)品名稱】：IL-17D,人白細胞介素17DELISA試劑盒原理

【檢(jian)測方法(fa)】：酶聯(lian)免(mian)疫法(fa)/酶免(mian)法(fa)(ELISA)

【產品性狀】：96T/48T，盒裝液體

【貯    藏】：2-8°C

【有 效(xiao) 期】：Elisa試劑(ji)盒(he)二年，我公(gong)司Elisa試(shi)劑盒均為批次，可放心購(gou)買(mai)。

【主要成分】：酶標板,試劑,標準品等。

【標    本】：血清(qing)/血漿/細胞培養(yang)上清(qing)液/組(zu)織(zhi)勻漿/組(zu)織(zhi)液/尿液/分(fen)泌物

【質(zhi)量承諾】：我(wo)們堅(jian)持對產品(pin)質(zhi)量作不斷的評估、創新和(he)改善以(yi)確保您對我(wo)們產品(pin)的高度信任。

【待檢樣(yang)本】：體(ti)液(ye)、血清(qing)、血漿、細胞培養上清(qing)液(ye)、尿液(ye)、組織勻漿、心房水標本等(deng)

【樣品采集】：Elisa試劑盒(he)收集(ji)標(biao)本(ben)前(qian)必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wen)定。對收集(ji)后當天(tian)進行檢測的標(biao)本(ben)，儲(chu)存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集(ji)標(biao)本(ben)，將標(biao)本(ben)及時分(fen)裝后放在-20℃或-70℃條件下保(bao)(bao)(bao)存。避免(mian)反復凍融。標(biao)本(ben)2-8℃可保(bao)(bao)(bao)存48小時，-20℃可保(bao)(bao)(bao)存1個(ge)月。-70℃可保(bao)(bao)(bao)存6個(ge)月。部分(fen)激素(su)類標(biao)本(ben)需添加抑肽(tai)酶。

【保 質 期】：半年(六個月)

一、“IL-17D,人白細胞介素17DELISA試劑盒原理”特點概述(shu)

1.專一(yi)性強。抗原與(yu)抗體(ti)(ti)的免疫(yi)(yi)反應是專一(yi)反應，而免疫(yi)(yi)酶(mei)技術以免疫(yi)(yi)反應為基礎(chu)，所檢測(ce)的對象是抗原(或抗體(ti)(ti))，使(shi)用(yong)的抗體(ti)(ti)除標記了酶(mei)以外，與(yu)普通抗體(ti)(ti)的免疫(yi)(yi)反應特性并無多大差別。

2.靈敏度高(gao)。由于抗體聯結上(shang)了酶(mei)(mei)，因此，借(jie)助于酶(mei)(mei)與(yu)底物的顯色(se)反應(ying)，顯示抗原(yuan)與(yu)抗體的結合，大大提高(gao)了檢(jian)測(ce)的靈敏性(xing)，使檢(jian)測(ce)水平接近(jin)放(fang)射免疫(yi)測(ce)定(ding)法(fa)。

3.樣品易(yi)保存(cun)。經過酶(mei)反應(ying)顯示(shi)的有色產物(wu)大多比(bi)較穩(wen)定，因此有利于樣品的保存(cun)。

4.結果(guo)(guo)易觀察(cha)。對檢(jian)(jian)測(ce)結果(guo)(guo)即可用(yong)(yong)肉眼觀察(cha)，又可用(yong)(yong)顯(xian)(xian)微(wei)鏡觀察(cha)，也可以(yi)用(yong)(yong)分光光度計(ji)進行比色測(ce)定，還(huan)可用(yong)(yong)顯(xian)(xian)微(wei)鏡觀察(cha)。這是因為某些酶反應產(chan)物能使電子密(mi)度發生(sheng)改變，從(cong)而引起(qi)被(bei)檢(jian)(jian)測(ce)物的顯(xian)(xian)示。

5.可(ke)以(yi)(yi)定(ding)量(liang)(liang)測(ce)定(ding)。溶液中的抗(kang)原物質，應用酶(mei)免吸附(fu)技術(shu)進行比(bi)色測(ce)定(ding)，依據光(guang)(guang)密度值(zhi)的變化(hua)，可(ke)以(yi)(yi)定(ding)量(liang)(liang)。預計用細胞分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計可(ke)對組織內的抗(kang)原進行免疫酶(mei)技術(shu)的定(ding)量(liang)(liang)測(ce)定(ding)。

6.可(ke)以大規模(mo)測定樣(yang)品。如有(you)成(cheng)千上萬份樣(yang)品需(xu)要進行(xing)檢測，免疫酶技術都(dou)能在(zai)較(jiao)短時間內(nei)完成(cheng)。

7.儀(yi)(yi)(yi)器(qi)和試(shi)劑簡單。對免疫沒技術來說(shuo)，不需(xu)要(yao)熒光顯微鏡(jing)，也(ye)不需(xu)要(yao)測定放(fang)射性的特殊儀(yi)(yi)(yi)器(qi)，所(suo)用儀(yi)(yi)(yi)器(qi)及(ji)試(shi)劑均(jun)屬一般(ban)性儀(yi)(yi)(yi)器(qi)與試(shi)劑，普通實(shi)驗室及(ji)生產應(ying)用單位均(jun)易購置

6、*，質量保證，最大限度(du)的節省實驗經費(fei)。

二、ELISA試(shi)劑盒(he)檢測概述
    ELISA（酶(mei)聯接(jie)免疫吸(xi)附反(fan)應分析）是以免疫學反(fan)應為基礎，將抗(kang)(kang)原、抗(kang)(kang)體的(de)(de)特異性(xing)反(fan)應與酶(mei)對底物的(de)(de)高效催化作用相(xiang)(xiang)結合起來的(de)(de)一(yi)種(zhong)敏感性(xing)很高的(de)(de)實驗技術(shu)。 由(you)于抗(kang)(kang)原、抗(kang)(kang)體的(de)(de)反(fan)應在一(yi)種(zhong)固相(xiang)(xiang)載體-聚苯乙烯微量(liang)滴定(ding)板的(de)(de)孔(kong)中進(jin)行，每加入一(yi)種(zhong)試(shi)劑孵(fu)育后，可通過洗滌除去多(duo)余的(de)(de)游(you)離反(fan)應物，從而保(bao)證(zheng)試(shi)驗結果的(de)(de)特異性(xing)與穩定(ding)性(xing)。
實際(ji)應(ying)用(yong)中，通過不同的設計，具(ju)體的方法(fa)(fa)步驟可有多種。即：用(yong)于檢(jian)(jian)測(ce)抗(kang)(kang)(kang)體的間接(jie)法(fa)(fa)、用(yong)于檢(jian)(jian)測(ce)抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)的雙(shuang)抗(kang)(kang)(kang)體夾心(xin)法(fa)(fa)以及用(yong)于檢(jian)(jian)測(ce)小分子抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)或(huo)半抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)的抗(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)競(jing)爭法(fa)(fa)等等。目前我們對客戶提供比較常用(yong)的ELISA雙(shuang)抗(kang)(kang)(kang)體夾心(xin)法(fa)(fa)及ELISA間接(jie)法(fa)(fa)服務。
三(san)、實驗過程：

1.  試(shi)劑準備：所有試(shi)劑都必(bi)須在使用(yong)前達(da)到室溫，使用(yong)后(hou)請(qing)立(li)即按(an)照說明書要求保存試(shi)劑。  實驗操作中請(qing)使用(yong)一次(ci)性的吸(xi)頭，避免交叉污染。

2.   加樣(yang)(yang)：加樣(yang)(yang)或加試劑時(shi)，請注意(yi)在吸(xi)取(qu)標(biao)(biao)本 / 標(biao)(biao)準品，酶結合物(wu)或底物(wu)時(shi)，*個孔與最后(hou)一(yi)個孔加樣(yang)(yang)之(zhi)間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔如(ru)果太大，將會導致不同的 “預孵育"時(shi)間(jian)，從(cong)而明顯地影響(xiang)到測量(liang)值的準確(que)性及重復性。一(yi)次加樣(yang)(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括標(biao)(biao)準品及所有樣(yang)(yang)品)控制(zhi)在10分鐘內，如(ru)標(biao)(biao)本數量(liang)多，推薦(jian)使用多道移液器加樣(yang)(yang)。

3.   孵育(yu)(yu)：為防止樣(yang)品蒸發，試驗時將反應(ying)板放于鋪有濕(shi)布(bu)的(de)密閉盒內，酶標(biao)板加上蓋或覆(fu)膜，以(yi)避免液體蒸發；洗板后應(ying)盡快進行下步操作，任何時侯都(dou)應(ying)避免酶標(biao)板處于干(gan)燥狀(zhuang)態(tai);同時應(ying)嚴格遵守給定(ding)的(de)孵育(yu)(yu)時間和溫度(du)。

4.   洗(xi)滌：洗(xi)滌過程(cheng)中反應孔(kong)中殘留(liu)的(de)洗(xi)滌液應在(zai)濾紙上充(chong)分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔(kong)中吸(xi)水，同時要(yao)消除板底殘留(liu)的(de)液體和手指印，避免影響最后的(de)酶標儀讀數。

四、常見問題解答

小(xiao)編簡單整理了5個問題，具體內(nei)容如下：

1、一個ELISA試劑盒檢測(ce)幾個(ge)樣品？

小(xiao)編自己在(zai)各大論壇看(kan)到zui多的三(san)個答案：

1）48T 可做(zuo)(zuo)42個樣本加(jia)(jia)6個標(biao)(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)；96T 可做(zuo)(zuo)90個樣本加(jia)(jia)6個標(biao)(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)

2）以(yi)96T試(shi)劑盒來(lai)算，定量(liang)的(de)(de)試(shi)劑盒一般可以(yi)做90個左右的(de)(de)樣品，定性的(de)(de)試(shi)劑盒可以(yi)做94個左右的(de)(de)樣品

3）96T的ELISA試劑盒，去除標準品復孔檢(jian)測(ce)(ce)，zui多(duo)還能(neng)檢(jian)測(ce)(ce)80個標本；48T的zui多(duo)30個樣本。

2、elisa試劑盒96T的(de)能(neng)做檢測多少血清樣品？板能(neng)重復(fu)利用嗎？

96T，一般做復孔的(de)話，做標準(zhun)曲線需要16個孔，剩下(xia)80個孔就可(ke)以做40個樣本。這個板不(bu)能重復利用。而且配(pei)套的(de)試劑也只是(shi)夠(gou)一塊板子用的(de)。

3、想(xiang)(xiang)請教一下(xia)，我想(xiang)(xiang)用(yong)elisa法測血清(qing)里的一種(zhong)(zhong)抗(kang)原(yuan)，查了(le)資料，發(fa)現沒有現成的試劑(ji)盒用(yong)，現在就有2種(zhong)(zhong)備(bei)選(xuan)方案，一種(zhong)(zhong)是買抗(kang)體對自(zi)己包被（查了(le)R&D等大公(gong)司都(dou)沒有可用(yong)于elisa的單抗(kang)）。哪(na)種(zhong)(zhong)比較好呢(ni)？自(zi)己包被的會不會比國產的試劑(ji)盒可靠呢(ni)？

如(ru)果(guo)你覺得(de)技術(shu)不錯有隊其他公司不放心(xin)(xin)，可以自(zi)己(ji)(ji)購買(mai)抗體(ti)對自(zi)己(ji)(ji)包被，這個就是麻煩點，自(zi)己(ji)(ji)包被用著放心(xin)(xin)，舒(shu)心(xin)(xin)；

4、western 和ELISA 處(chu)理樣(yang)本有(you)何差別？

Western Blot 樣品制(zhi)備(bei)要(yao)加蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)裂(lie)解(jie)(jie)液（含有(you)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)酶(mei)抑制(zhi)劑），然后冰上(shang)研(yan)磨，收集于EP管，冰上(shang)裂(lie)解(jie)(jie)30min，4度12000rpm離心15min，取上(shang)清(qing)分裝(zhuang)，即(ji)得到(dao)蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)樣品。建議直接電泳，多(duo)余的-80保存。建議分裝(zhuang)的蛋(dan)(dan)白(bai)(bai)每支略多(duo)于一(yi)(yi)次上(shang)樣量(liang)，一(yi)(yi)次性用(yong)完(wan)一(yi)(yi)支，避免反復凍融。

ELISA樣品，直(zhi)接腦(nao)組織冰(bing)上(shang)勻(yun)漿，收集于EP管(guan)，同上(shang)一樣離心，大約220-250ul每支(zhi)分裝（因為ELISA上(shang)樣量基本都是(shi)每孔(kong)100ul，做復孔(kong)，每個樣品2孔(kong)，就需要200ul，為了(le)避(bi)免不夠2孔(kong)，分裝時(shi)要大于200ul每支(zhi)），直(zhi)接實驗。多余(yu)的-80保存，一樣避(bi)免反復凍融。

不過ELISA少量樣品進(jin)行預實驗，或(huo)者查閱文(wen)獻，看看大概組(zu)織里有多高濃(nong)度，選擇合適的試(shi)劑盒，測量范圍(wei)要與組(zu)織濃(nong)度相符。避免濃(nong)度過高測量不準(zhun)，或(huo)者濃(nong)度過低，小于試(shi)劑盒最(zui)低可測濃(nong)度。

5、Elisa試(shi)劑盒(he)該買(mai)哪家(jia)公司的呢？

提(ti)出這個問(wen)題的(de)朋友(you)其(qi)(qi)實(shi)該打，目前國際上(shang)各(ge)個品牌(pai)的(de)試劑盒生廠商，都會有其(qi)(qi)偏(pian)重(zhong)點，像BIM、R&D等品(pin)牌在細胞因子方面的試劑盒就(jiu)非常好(hao)，而其他牌(pai)子也一樣的。

Bender：粘(zhan)附分子方面(mian)的試(shi)劑盒；

Cayman：花生四烯酸類產品的試(shi)劑盒(he)；

Merck(Linco)：內分泌研究方(fang)面的試劑(ji)盒；