人T淋巴(ba)細胞白血病(bing)病(bing)毒p19（HTLV p19）試劑盒使用說(shuo)明書

本試劑(ji)盒僅(jin)供研究使用(yong)。

檢測范圍(wei)：                                                             48T

1pg/ml -50 pg/ml

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體(ti)樣本中T淋巴細胞白血病(bing)(bing)病(bing)(bing)毒p19（HTLV p19）含(han)量(liang)。

實驗(yan)原理

本試劑盒(he)應用雙抗體夾心法測定(ding)標(biao)本中人T淋(lin)巴細胞白(bai)血病病毒p19（HTLV p19）水平(ping)。用純化(hua)的人T淋(lin)巴細(xi)胞白(bai)血病(bing)(bing)病(bing)(bing)毒p19（HTLV p19）抗體包被(bei)(bei)微孔板，制成固相抗體，往包被(bei)(bei)單抗的微孔中依次加入T淋(lin)巴細胞(bao)白血病(bing)病(bing)毒(du)p19（HTLV p19），再與HRP標記的T淋巴細胞(bao)白血(xue)病(bing)病(bing)毒p19（HTLV p19）抗體(ti)結合，形(xing)成抗體(ti)-抗原-酶(mei)標抗體復合物，經過che底洗滌后加底物TMB顯(xian)色(se)。TMB在HRP酶的(de)催化(hua)下轉化(hua)成藍色，并(bing)在酸的(de)作(zuo)用下轉化(hua)成最終的(de)黃色。顏(yan)色的(de)深(shen)淺和樣品(pin)中的(de)T淋(lin)巴細胞白血病病毒p19（HTLV p19）呈正(zheng)相關。用酶標儀在450nm波長(chang)下測定(ding)吸光度（OD值），通過標準曲(qu)線計算樣(yang)品(pin)中(zhong)人T淋巴細胞白(bai)血病病毒(du)p19（HTLV p19）濃度。

試劑盒組成

標本要求 

1．標本采(cai)集后盡(jin)早(zao)進行(xing)提取(qu)，提取(qu)按相關文獻進行(xing)，提取(qu)后應盡(jin)快進行(xing)實驗(yan)。若(ruo)不能馬(ma)上(shang)進行(xing)試驗(yan)，可將標本放于-20℃保存，但(dan)應避免反(fan)復凍(dong)融

2．不能(neng)檢測(ce)含(han)NaN3的樣品，因NaN3抑(yi)制辣根過(guo)氧化物酶(mei)的(de)（HRP）活(huo)性。

操作步驟

1. 標(biao)準品的稀(xi)釋(shi)：本試劑盒提(ti)供原倍標(biao)準品一支，用戶可按照下列圖表在小(xiao)試管中進行稀(xi)釋(shi)。

2. 加樣：分別(bie)設空(kong)白(bai)孔（空(kong)白(bai)對照孔不加樣品及酶(mei)標試劑，其(qi)余各(ge)步操作(zuo)相同(tong)）、標準孔、待測樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標包被板上(shang)標準(zhun)品準(zhun)確加樣(yang)50μl，待(dai)測樣(yang)品孔中先加樣(yang)品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加(jia)樣將樣品加(jia)于酶標板(ban)孔(kong)(kong)底部(bu)，盡量不(bu)觸及孔(kong)(kong)壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封(feng)板膜封(feng)板后(hou)置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍(bei)稀(xi)釋后備(bei)用(yong)

5. 洗(xi)滌：小心(xin)揭掉封板膜，棄去液(ye)體(ti)，甩干(gan)，每孔加滿洗滌液，靜置30秒(miao)后棄去，如(ru)此重復5次(ci)，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔(kong)除外。

7. 溫育(yu)：操(cao)作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯(xian)色：每孔先加入顯(xian)色劑A50μl，再加入顯(xian)色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終(zhong)止(zhi)反應（此時(shi)藍(lan)色立轉黃色）。

11. 測定(ding)：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔(kong)的吸光(guang)度（OD值）。 測定(ding)應在加(jia)終止液后15分鐘以(yi)內(nei)進行。

注(zhu)意事(shi)項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗(xi)滌液可(ke)能會有(you)結晶析出，稀釋時可(ke)在水浴中加溫(wen)助溶，洗(xi)滌(di)時不(bu)影(ying)響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的(de)同時做(zuo)標準(zhun)曲(qu)線(xian)，最(zui)好做(zuo)復孔。如標本(ben)中待(dai)測物質含量過高(gao)（樣本(ben)OD值大于標(biao)準品(pin)孔(kong)第一孔(kong)的OD值），請先(xian)用樣品稀(xi)釋液稀(xi)釋一定倍(bei)數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以(yi)總稀釋倍數(shu)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次(ci)性使用，以避(bi)免(mian)交(jiao)叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

保存條件及有(you)效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月