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羥自由基清除能力測定試劑盒 微量法

更新時間:2023-03-20

簡要描述:

恒遠(yuan)生物(wu)生化(hua)試劑盒應用領域廣泛,涉(she)及酶(mei)類(lei)、氧化(hua)應激、鐵死亡、肝功(gong)(gong)能、腎功(gong)(gong)能、糖(tang)酵(jiao)解、無機鹽離子、脂質代(dai)謝、植物(wu)抗逆性等(deng)。檢測樣本類(lei)型豐富,主要的(de)(de)檢測儀(yi)(yi)器為酶(mei)標儀(yi)(yi),分光(guang)(guang)光(guang)(guang)度計和(he)(he)熒(ying)光(guang)(guang)酶(mei)標儀(yi)(yi)。我們(men)將以高度的(de)(de)責任感和(he)(he)出色的(de)(de)產品(pin)質量為客戶提(ti)供(gong)高效專(zhuan)(zhuan)業(ye)(ye)的(de)(de)生化(hua)代(dai)測服(fu)務和(he)(he)實驗(yan)技術(shu)解決方案。豐富的(de)(de)經驗(yan)、優(you)良的(de)(de)品(pin)質、充足(zu)的(de)(de)庫(ku)存、準確的(de)(de)交貨時間(jian),所有這些(xie)保證(zheng)了我們(men)向(xiang)您提(ti)供(gong)的(de)(de)專(zhuan)(zhuan)業(ye)(ye)優(you)質的(de)(de)服(fu)務。

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中文名稱

羥自由基清除能(neng)力測定試劑盒

規格96樣
貨號

A-037-SH

價格面議
樣本類型血(xue)清(qing),血(xue)漿,組織(zhi)勻漿,細胞裂解液(ye)、細胞培養上清(qing)液(ye)等
檢測范圍詳見(jian)說明書
檢(jian)測方(fang)法

微量法

貨期3-5天
說明書咨詢我司業務員獲取
文(wen)獻(xian)咨詢(xun)我司業務員獲取(qu)


  正式測(ce)定前務必取2-3個預期差異較(jiao)大的樣本做(zuo)預測定(ding)

測定意義:

羥自由基(ji)作(zuo)用(yong)于體內蛋(dan)白質、核酸、脂類等生物分子(zi),造成細胞結(jie)構和功能(neng)(neng)受損,進而(er)導致體內代謝紊亂引起(qi)疾(ji)病。羥自由基(ji)清除能(neng)(neng)力(li)是(shi)樣品(pin)(pin)抗氧化能(neng)(neng)力(li)的重要指標之(zhi)一,在(zai)抗氧化類保(bao)健品(pin)(pin)和藥品(pin)(pin)研究中得(de)到(dao)廣泛應用(yong)。

測定原理

H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應產生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶(rong)液(ye)中Fe2+氧(yang)化為Fe3+ ,導致536nm吸光度下降,樣品對536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。


自備用品:

恒溫水浴(yu)鍋、酶標儀、96孔板和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體(ti)100 mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液(ye)體12mL×1瓶,4℃保存(cun)。

試劑二:液體6mL×1瓶(ping),4℃避光保存(cun)。

試(shi)劑三:液體12 mL×1瓶,4℃避(bi)光保存。

試劑四:液體6mL×1瓶,4℃保存。

樣品(pin)的制備:

1. 組織:按照組(zu)織質量(g):提取液(ye)體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液(ye))進行冰(bing)浴(yu)勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰(bing)上待測。

2. 血清、果汁(zhi)等液(ye)體(ti)樣(yang)品可(ke)直(zhi)接測定。

3. 提取物(wu)(或者藥物(wu))可配制成(cheng)一定濃度,如5 mg/mL。


操作步(bu)驟:

1、 酶標儀(yi)預熱30min,調節波長至536nm。

2、 工作液配(pei)制(zhi):使用之前按照每管(guan)試(shi)劑(ji)一:試(shi)劑(ji)二:試(shi)劑(ji)三=100:50:100(µL)的比(bi)例配制,用(yong)多(duo)少(shao)配多(duo)少(shao),混(hun)勻。

3、 EP管中加入如下試劑


空白管

對照管

測定(ding)管

工作液µL)

250

250

250

混勻,防止局部顏色過(guo)濃

樣品(µL)



50

試劑四(µL)


50

50

H2O(µL)

100

50


混勻37℃保溫60min,8000g 25℃離心5min,吸取200μL于96孔(kong)板中測定536nm處吸光值空白管、對照管和測定管的吸光值分別記為A空、A對和A測。

注(zhu)意:空白管和對照管只(zhi)需(xu)測定(ding)一次。


計算(suan)公式:

羥自由基清除率(lv) D% =(A測-A對)÷(A空-A對)×100%

A空、A對、A測(ce):空白管(guan)、對照管(guan)和測(ce)定管(guan)的吸(xi)光值。


注(zhu)意事項:

為了比較不同樣(yang)品(pin)羥自由基清除(chu)能(neng)力,對于同一批樣(yang)品(pin)必須加入(ru)等量的樣(yang)品(pin),血清、組織(zhi)勻(yun)漿、果汁等液(ye)體樣(yang)品(pin)加入(ru)同樣(yang)體積,提取物(wu)(或(huo)者藥物(wu))配(pei)制成同樣(yang)濃度。




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